柑橘黄龙病菌

柑橘黄龙病菌

【学名】  Candidatus liberobacter asiaticus和Candidatus liberobacter africanus

【英文名】  Huanglongbing

【分类地位】  此菌为革兰氏阴性细菌，归属变型菌纲  亚纲分科地位尚未确定的韧皮部杆菌属。

据近期报道，在巴西引起柑橘黄龙病的病原为Candidatus liberobacter americanus。

【我省分布】怀化市、永州市。

【寄主范围与危害特点】  此菌可以侵染芸香科柑橘属和金柑属植物，引发症状。在田间未见枳发病，仅枳橙发病。通过菟丝子，此菌可以侵染长春花。在自然界，芸香科蚝壳刺属和木苹果属植物可能受此菌侵染，九里香属植物常见着生大量传播柑橘黄龙病的柑橘木虱，但其体内未见病原菌。

柑橘属的宽皮柑橘、甜橙、柚、柠檬、来檬、香橼、葡萄柚和酸橙的实生植株或嫁接植株均受为害。病害引起叶片黄化，早落，再发的梢短、叶小；病树不长新根，有的根部腐烂，大量枝条枯死；果实早落，或果小、畸形、味淡，失去商品价值。病树加压注射四环素后，可以恢复正常生长、结果，但1～2年后病害复发，治疗措施不宜推广应用，目前，病树无法治愈。

【典型症状】  开始发病时，部分大枝的新梢叶片黄化，呈现“黄梢”症状。夏、秋梢期开始发病的，“黄梢”数量少，常出现在树冠顶部；春梢期开始发病的，“黄梢”数量多，出现在树冠顶部，亦出现在树冠的其他部位。从部分大枝发病扩展到全株发病，一般经历1～2年。病枝容易落叶，从病枝萌发的新梢短，叶小、黄化。

叶片黄化大体有三种类型：(1)均匀黄化。嫩叶不转绿而呈现均匀黄化。蕉柑和桠柑夏秋梢期开始发病的较多出现这种症状。(2)斑驳型黄化。叶片转绿后从叶片基部和叶脉附近开始黄化，形成黄绿相间的斑驳，最后可以全叶黄化。植株开始发病时，大多呈现这种症状，春梢期开始发病的，几乎全部呈现这种症状。从病枝上萌发的新梢生长较强的，亦呈现这种症状。(3)缺素状黄化。叶脉附近绿色，而叶肉黄化，类似缺锌、缺锰症状。这种症状在植株开始发病时极少出现，而在病枝萌发的新梢上较多出现。在上述3种黄化类型中，叶片的斑驳型黄化最具有特征性。

此外，病叶较健叶厚，摸之有革质感，在枝上着生较直立，有的叶脉肿突，局部木栓化开裂。病树开花早，花多，畸形花比例大，落花落果严重。病树果实小，有的畸形呈斜肩状，着色时黄绿不均匀，福橘、桠柑、温州蜜柑等宽皮柑橘常在果蒂附近先着色，而其余部分青绿色，成“红鼻果”。病树极少长新根，老根容易从细根开始腐烂。在栽培管理粗放的果园，病树有大量枯枝。病树可以长期存活。

一般，枝叶症状最先出现；有时，果实症状先出现，翌年呈现枝叶症状。

【病原形态与生物学特性】  超薄切片用电子显微镜观察菌体呈圆形、长圆形和短杆状。圆形、长圆形菌体大小50～600nmX170～1 600nm，短杆状菌体长1000～4000nm，平均约2000nm。细胞壁厚20～25nm，细胞壁外层不平整。

此菌寄生限于寄主植物韧皮部，系统侵染，但分布不均匀，尚无法分离培养。在非洲，柑橘黄龙病的病原菌Candidatus liberobacter africanus对热敏感，常在较为冷凉的气候(20～25℃)条件下引起症状，在较高温度(27—30℃)条件下不显症状；而亚洲的病原菌Candidatus liberobacter asiaticus则耐高温，在较高温度(35℃)条件下也可以引起症状。此菌对四环素敏感，对土霉素也敏感。

【传播途径与发病条件】  此菌通过带病的苗木、接穗和柑橘木虱传播。种子不传病。柑橘木虱的若虫和成虫从病株吸食病原菌后，在其体内繁殖，终生带菌，不通过卵传递。在亚洲传播柑橘黄龙病的柑橘木虱为Diaphorina citri Kuwayama，在非洲为Trioza erytreae Del Guercio。实验证明， D.citri亦可以传播非洲的柑橘黄龙病病原菌，T.erytreae亦可以传播亚洲的病原菌。

柑橘黄龙病为害柑橘所有种类(品种)的实生植株和嫁接植株，其发病的条件：(1)果园生态环境方面，在高纬度、高海拔地区，温度偏低，没有柑橘木虱分布，即使有少量病株，亦不会蔓延而致柑橘黄龙病大发生；在较高山岭的山沟果园，比较遮荫不利柑橘木虱生存，亦无柑橘黄龙病大发生。(2)栽培管理方面，管理粗放的果园少喷杀虫剂，柑橘木虱多，加速柑橘黄龙病蔓延。(3)病源数量方面，病株率高的果园及其相邻果园内，在未能严格防除柑橘木虱的情况下，病害蔓延迅速。病株是病源，由于病树落叶后经常萌发新梢，有利于柑橘木虱大量繁殖，加速了病害蔓延。

【检测方法】  叶片的斑驳型黄化症状具有特征性，它在不同品种的寄主植物和植株发病的不同阶段，一般都有出现，可以用作田间诊断柑橘黄龙病的主要依据。如果这种症状不清晰，可以重剪病枝，促发比较强壮的新梢，以利斑驳型黄化症状显现。“红鼻果”是在福橘、桠柑和温州蜜柑等寄主植物上的常见症状，由于脚腐病等其他原因可以引起相似症状，因此根据“红鼻果”诊断柑橘黄龙病，需要慎重。

在依据症状无法确诊的情况下，可采用下述方法检测。

(1)嫁接传染性和对青霉素敏感性测定。黄龙病病原细菌通过嫁接传播，对四环素、青霉素敏感。9月下旬至10月中旬或2月下旬至4月下旬，从可疑病株采接穗，分为两组，分别用清水和1000mg／kg盐酸青霉素浸泡2h，用清水冲洗。取芽嫁接于桠柑或甜橙苗木主干中下部，每株嫁接2～3个芽，每处理嫁接20株，试验在产区防虫网室内进行。如果可疑病株是柑橘黄龙病病株，在嫁接接种后1年内，接穗用清水浸泡后嫁接接种的苗木大部分发病，而用青霉素液浸泡的不发病或个别苗木发病。

(2)应用分子生物学多聚酶链式反应(PCR)检测。采可疑病树已显症状的枝、叶、果，应用PCR检测，可以在短期内得到结果。

【检疫措施与防治方法】

1.严格实施植物检疫，防止疫区苗木进入非疫区

2.建立无病母本园和无病苗圃，培育无病苗木

(1)选择园、圃地址。无病母本园和无病苗圃的地点可以选在没有柑橘木虱发生的非疫区；如在疫区，母本园可设在防虫网室内，苗圃与已有果园相距1km以上。

(2)培育无病苗木。培育无病苗木必须使用无病接穗，可通过下述方法获得。

①茎尖嫁接脱毒。一般在健树采集嫩梢用常规方法育成茎尖嫁接苗，经在隔离条件下观察1年后，不发病者用作母本苗。

②热处理消毒。a.间歇热处理。在无病或轻病果园成年健树上采集接穗，在47℃热水中浸泡10min，取出后隔24h再同样处理，共处理3次后用于繁殖母本苗。b.湿热空气处理。从无病或轻病果园成年健树采集接穗嫁接成苗，在49℃湿热空气中处理50min，用作母本苗。

(3)四环素处理消毒。从无病或轻病果园成年健树上采集接穗，用1 000单位／ml盐酸四环素浸泡2h，用清水冲洗后，用于繁殖生产用苗或母本苗。

3.选择新果园建园地点  建立新果园的地点要与病果园尽量隔离。重病区要在整片植株清除后重新种植。

4.严格防除传病媒介——柑橘木虱  每次新梢萌动后喷布杀虫剂1～2次，防治效果以有机磷最好。

5.及时挖除病株  可在春梢老化后和采果前普查发病情况各一次，发现病株及时挖除。